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一、聚苯乙烯細(xì)胞培養(yǎng)皿（塑料培養(yǎng)皿）是生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室中最基本的工具。因此體外的玻璃形式由Petri于1887年引入。除疏水性塑料的幾何改性和親水轉(zhuǎn)化外，聚苯乙烯塑料培養(yǎng)皿在130年內(nèi)基本保持不變。今天，聚苯乙烯培養(yǎng)皿在藥理學(xué)和生物材料測(cè)試（細(xì)胞培養(yǎng)，動(dòng)物模型，臨床試驗(yàn)）的開始，它用于詢問(wèn)細(xì)胞，但也用于人類生命的開始，即體外受精。以前的實(shí)驗(yàn)工作挑戰(zhàn)了聚苯乙烯培養(yǎng)皿的生物耐受性：Sommer等。表明當(dāng)與水性介質(zhì)接觸時(shí)，聚苯乙烯變軟，促進(jìn)納米級(jí)堿性層的形成的效果與包埋的ROS一起對(duì)細(xì)胞具有不利影響。
二、在干燥之前，應(yīng)該沒(méi)有來(lái)自緩動(dòng)劑的內(nèi)臟的食物。在干燥前一天執(zhí)行這些步驟。
1.將~2 mL泉水倒入新的35 mm塑料培養(yǎng)皿中。
2.將緩釋劑轉(zhuǎn)移到含有泉水的新菜中，將其從食物中分離出來(lái)。通過(guò)在室溫下將它們留在盤子中過(guò)夜來(lái)使心臟病死亡。
3.將含有~5 mL 10％甘油溶液（1份甘油，9份泉水）的玻璃表盤放入帶蓋的小塑料盒中。
4.將盒子在室溫下放置過(guò)夜（約16小時(shí)）。
5.使用濕度計(jì)檢查腔室內(nèi)的濕度。約16小時(shí)后相對(duì)濕度應(yīng)> 90％。準(zhǔn)備瓊脂涂層培養(yǎng)皿蓋在使用當(dāng)天準(zhǔn)備瓊脂涂層的蓋子。不要存放或重復(fù)使用涂層蓋子。
6.用瓶裝泉水準(zhǔn)備2％瓊脂溶液，煮沸。
7.將 300μL沸騰瓊脂溶液移液到35mm培養(yǎng)皿的蓋子中。丟棄盤子本身; 只使用蓋子。
8.快速工作，使用移液器的尖端將瓊脂溶液均勻地分布在整個(gè)蓋子周圍。盡量減少過(guò)量的瓊脂和不均勻的分布。
9.將蓋子側(cè)面傾斜，使多余的瓊脂匯集到一側(cè)。用移液管從蓋子側(cè)面取出并丟棄多余的瓊脂。
10.讓薄瓊脂涂層固化并干燥5-10分鐘。
11.使用微量移液管將步驟2中的饑餓的緩動(dòng)劑轉(zhuǎn)移到步驟10的瓊脂涂覆的皿蓋上。盡量減少隨著緩步移植的水量。
12.使用微量移液管從盤蓋上除去多余的水。
13.將含有緩動(dòng)劑的瓊脂涂層蓋子放入步驟5的加濕室中，并孵育過(guò)夜（約16小時(shí)）。
14.從加濕室中取下蓋子，用解剖顯微鏡檢查干燥的樣品。標(biāo)本應(yīng)該采用圓形的墩狀外觀。
15.將緩動(dòng)劑保持在環(huán)境濕度（~40％相對(duì)濕度）下24小時(shí)，然后在室溫下將其覆蓋在干燥器中。
16.將 2 mL瓶裝泉水移入培養(yǎng)皿蓋。
當(dāng)在解剖顯微鏡下觀察時(shí)，已經(jīng)干燥儲(chǔ)存24小時(shí)的緩動(dòng)劑在10分鐘內(nèi)開始退出其屯狀態(tài)。通常在30-60分鐘內(nèi)觀察到協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)。生存率通常為~80％，并通過(guò)對(duì)協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)和對(duì)刺激的反應(yīng)（用微量移液管尖端接觸）進(jìn)行評(píng)分來(lái)判斷。
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